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Titre : | Activité des bactériocines contre les biofilms dEnterococcus faecalis et Enterococcus faecium |
Auteurs : | Benali Hind Bentayeb, Auteur ; Hecto Rodriguez Villalobos, Promoteur |
Type de document : | Travail de fin d'études |
Editeur : | Woluwe-Saint-Lambert : Haute École Léonard de Vinci, 2023 |
Langues: | Français |
Index. décimale : | TFE - Biologie médicale |
Descripteurs : |
HE Vinci Antibactériens ; Enterococcus |
Mots-clés: | biofilms ; Enterococcus faecalis ; Enterococcus faecium ; bactériocines |
Résumé : | Avec l'émergence croissante des résistances bactériennes, il y a un grand besoin de multiplier les stratégies de traitement afin de combattre plus efficacement les souches multirésistantes émergentes. Parmi les espèces du genre Enterococcus (famille des Enterococcaceae), E. faecium et E. faecalis sont les principales espèces pathogènes dans les premières lignes de front des résistances microbiennes. Leur grande capacité à acquérir des gènes de résistance et à former des biofilms les rend plus facilement résistants aux agents antibactériens. Les biofilms sont un problème mondial car ils facilitent grandement la propagation de la résistance dans l'environnement hospitalier. Ils sont le principal facteur de virulence des espèces E. faecalis et E. faecium qui sont de forts producteurs de biofilms. Les biofilms sont des communautés de micro-organismes qui adhèrent à des surfaces biologiques ou non biologiques entourées d'une matrice extracellulaire. Ils sont régulés et coordonnés par le système Quorum sensing en fonction de leur densité bactérienne. La résistance des biofilms provient de leur perméabilité réduite aux antibiotiques qui les empêche de s'infiltrer à travers la matrice extracellulaire. Les bactériocines sont de petits peptides antimicrobiens synthétisés par les bactéries avec une activité bactériostatique ou bactéricide envers les espèces proches du germe producteur. En raison de leur capacité à former des pores à travers la paroi bactérienne, elles pourraient constituer un nouvel outil permettant aux antibiotiques d'agir plus efficacement. Cela permettrait aux antibiotiques qui sont ralentis par la paroi bactérienne, comme les aminoglycosides, de pénétrer plus facilement à l'intérieur des bactéries. L'objectif principal de cette étude est donc d'étudier une nouvelle stratégie thérapeutique impliquant des bactériocines en synergie avec des antibiotiques afin de traiter efficacement les biofilms d'Enterococcus. Tout d'abord, les concentrations minimales inhibitrices des souches cliniques ont été évaluées en utilisant deux méthodes : la microdilution liquide (turbidité et lecture de la résazurine) et la plaque commerciale SENSITITRE-GPN3F. Les lectures de résazurine pour la méthode de microdilution ont montré une plus grande sensibilité que la turbidité. Il y a 7 souches sur 14 qui sont des ERV et 64% ont montré une résistance à l'ampicilline et à la ciprofloxacine mais aucune au linézolide. Ensuite, leur capacité à produire des biofilms a été évaluée à travers leur biomasse (par Crystal violet), pour laquelle seul un tiers des souches (4/14) a été considéré comme producteur de biofilms. Il y a une tendance systématique d'augmentation de la biomasse des biofilms de 48h par rapport aux biofilms de 24h. L'activité métabolique des bactéries au sein des biofilms a été mesurée grâce à la résazurine et a atteint le pic maximum après 1 h 30 d'incubation. Après la caractérisation des biofilms, deux bactériocines Z et K ont été testées seules pour les bactéries planctoniques dEnterococcus par microscopie accélérée. La bactériocine Z a montré une plus grande efficacité pour inhiber la croissance bactérienne à des concentrations plus faibles (≤1µg/ml) que la bactériocine K. Le système automatisé Phoenix a donc été utilisé pour permettre un criblage plus large des combinaisons de Bacteriocin Z (à 0,225µg/ml) avec des gradients d'antibiotiques. Finalement, une efficacité significative de Bacteriocin Z a été observée, notamment en synergie avec les aminoglycosides et les céphalosporines contre lesquels les Enterococcus sont naturellement résistants. |
Accès : | Identifiez-vous avant d'accéder au document électronique |
Disponible en ligne : | Oui |
Lieu du stage : | Av. Hippocrate n°10 ,1200 Woluwe-Saint-Lambert - Cliniques universitaires Saint-Luc (Micorbiologie) |
Département du TFE : | Biologie médicale |
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