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Titre : | Étude de la spécificité de deux senseurs de phéromones, ScuR et SarF, chez Streptococcus salivarius |
Auteurs : | Laura Vanderbiest, Auteur ; Pascal Hols, Promoteur |
Type de document : | Travail de fin d'études |
Editeur : | Woluwe-Saint-Lambert : Haute École Léonard de Vinci, 2021 |
Langues: | Français |
Index. décimale : | TFE - Biologie médicale |
Mots-clés: | Régulateur transcriptionnel ; Streptocoque salivarius ; quorum-sensing |
Résumé : |
L'espèce Streptococcus salivarius (S.sa) HSISS4 est une bactérie commensale stricte de l'homme située dans le tube digestif. Elle est étudiée dans notre laboratoire. Cette souche est capable d'induire une prédation afin d'inhiber les espèces pathogènes. Grâce à cela, S.sa va continuer à se développer dans son environnement. De plus, cette souche est également capable d'induire la compétence via un mécanisme naturel de transformation de l'ADN. Il a été démontré que ComR, une protéine régulatrice d'un système de communication intercellulaire, interagit avec ComS, son peptide inducteur de quorum-sensing, pour activer simultanément la prédation et la compétence.
Deux protéines paralogues du régulateur ComR ont été découvertes, à savoir ScuR et SarF, ainsi que leur peptide inducteur (sBI7) identifié via un crible aléatoire. ScuR contrôle les opérons sptA et slvX (salivaricine X) tandis que SarF contrôle uniquement l'opéron sptA. Chaque capteur de phéromone possède un domaine de liaison pour le peptide et un autre domaine pour la reconnaissance de l'ADN. Au cours de ce travail, nous avons étudié la spécificité du domaine de liaison à l'ADN de chaque protéine pour leurs sites promoteurs ainsi que la sélectivité de deux nouveaux peptides inducteurs pour ces protéines. Afin d'étudier la spécificité des protéines pour leur promoteur, nous avons généré des protéines de fusion dans lesquelles nous avons interchangé les domaines de liaison à l'ADN de chaque protéine. Ensuite, des tests d'activation in vivo ont été réalisés et ont mis en évidence les spécificités des domaines de liaison des protéines par rapport aux séquences promotrices, liées notamment au promoteur sptA. En ce qui concerne la sélectivité protéine-peptide, nous avons d'abord purifié les protéines ComR, ScuR et SarF. Ensuite, des essais de liaison in vitro (polarisation de fluorescence) ont été réalisés avec deux nouveaux peptides, ScuS1 et ScuS10. La même chose a été réalisée pour les peptides de référence sComS et sBI7 afin de pouvoir comparer avec les résultats précédents. En conclusion, nous avons ainsi mis en évidence les bases de la sélectivité moléculaire des trois protéines pour un de leur promoteur cible (PsptA). De plus, les résultats des essais de polarisation de fluorescence pourraient indiquer que le peptide ScuS1 pourrait être capable d'induire la dimérisation et la liaison à un promoteur plus facilement que sComS ou sBI7 pour leurs protéines respectives. |
Accès : | Identifiez-vous avant d'accéder au document électronique |
Disponible en ligne : | Oui |
Lieu du stage : | Biochemistry and Genetics of Microorganisms (BGM), Louvain Institute of Biomolecular Science and Technology (LIBST) |
Département : | Biologie médicale |
Documents numériques (1)
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