Login
Communauté Vinci
Extérieur
Si votre nom d'utilisateur ne se termine pas par @vinci.be ou @student.vinci.be, utilisez le formulaire ci-dessous pour accéder à votre compte de lecteur.
Titre : | Surexpression, purification et caractérisation de la protéine DPF3a |
Auteurs : | Alexia AGIE DE SELSATEN, Auteur ; Catherine Michaux, Promoteur |
Type de document : | Travail de fin d'études |
Editeur : | Bruxelles : Institut Paul Lambin, 2021 |
Langues: | Français |
Index. décimale : | TFE - Chimie |
Résumé : |
La DPF3 est une protéine faisant partie du complexe BAF qui est responsable du remodelage de la chromatine. Cette protéine possède une seconde fonction, un peu moins connue, au sein de la mitose.
Elle possède un motif composé dun double doigt de zinc de type PHD à son extrémité Cterminale, où un ion de zinc est retenu par deux résidus histidines ainsi que deux résidus cystéines. Par ailleurs, la DPF3 est soupçonnée de faire partie de la classe des protéines intrinsèquement désordonnées (IDPs) et possède deux isoformes : la DPF3a et la DPF3b. Celles-ci diffèrent par leur composition en acides aminés ainsi que par leur taille au niveau de leur extrémité Cterminale. La DPF3a serait plus désordonnée que la DPF3b. Ce travail porte donc uniquement sur létude du comportement spectroscopique de la DPF3a, plus atypique. Cest son extrémité C-terminale qui serait désordonnée. Deux constructions plasmidiques de la protéine ont été envisagées : une possédant une étiquette poly-histidines en N-terminal et une autre en C-terminal. Leffet de la position de létiquette de purification, du côté ordonné ou désordonné de la DPF3a, est donc étudié. La DPF3a a, en premier lieu, été surexprimée au sein dune souche bactérienne et purifiée par chromatographie daffinité. Létude de son comportement a été réalisée par électrophorèse SDS-PAGE, spectroscopie dabsorption en UV-visible, fluorimétrie ainsi quen DLS. La DLS permet de vérifier si la DPF3a se trouve sous forme dagrégats ; en effet les IDPs sont connues pour sagréger. La fluorimétrie a été utilisée de deux manières : i) pour observer la fluorescence des tryptophanes présents dans la structure, ii) pour détecter (ou non) la présence dagrégats amyloïdes. |
Accès : | Identifiez-vous avant d'accéder au document électronique |
Disponible en ligne : | Oui |
Lieu du stage : | Laboratoire de Chimie Physique des Biomolécules Département de Chimie, Université de Namur |
Département : | Chimie |
Documents numériques (1)
Ce document n'est visible qu'après identification
TFE Chimie Adobe Acrobat PDF |