| Titre : | Mise au point de méthodes pour la comparaison des propriétés biophysiques membranaires des cellules cancéreuses et non cancéreuses, hypoxiques et normoxiques, et la comparaison de leur sensibilité à des lipides oxydés |
| Auteurs : | Sanae Boulasmoum, Auteur ; Joseph Lorent, Promoteur |
| Type de document : | Travail de fin d'études |
| Editeur : | Woluwe-Saint-Lambert : Haute École Léonard de Vinci, 2023 |
| Langues: | Français |
| Index. décimale : | TFE - Biologie médicale |
| Descripteurs : |
HE Vinci Hypoxie ; Peroxydation lipidique ; Tumeurs |
| Mots-clés: | ferroptose ; GPMVs ; SUV ; séparation de phase ; radeau lipidique |
| Résumé : |
L'hypoxie est une caractéristique majeure de la plupart des tumeurs solides. En effet, les cellules à l'intérieur des tumeurs sont mal oxygénées et recrutent leur énergie principalement par des métabolismes non oxydatifs. Cela pourrait les rendre plus sensibles à la mort cellulaire oxydative telle que la ferroptose, qui peut être induite par les hydroperoxydes lipidiques. Les oxydes lipidiques peuvent en outre induire la mort cellulaire en modifiant les propriétés biophysiques des membranes, telles que la perméabilité ou la possibilité de former des domaines membranaires latéraux, appelés rafts. Nous étudions donc les différences de propriétés biophysiques des membranes plasmiques dans les cellules cancéreuses hypoxiques et normoxiques et les changements possibles induits par les lipides oxydés ainsi que la mort cellulaire induite. À cette fin, nous avons d'abord dû établir les protocoles nécessaires. Tout d'abord, nous avons établi un protocole pour la formation de vésicules géantes de la membrane plasmique (GPMV) afin d'étudier la formation de domaines latéraux ou de rafts. Ensuite, un protocole pour un système de livraison de lipides oxydés aux cellules cancéreuses a été développé, ce qui nous a permis d'établir l'efficacité du transfert de lipides vers les cellules cancéreuses. Enfin, nous avons étudié qualitativement et quantitativement la mort cellulaire induite par le système d'administration en utilisant la microscopie à fluorescence. Nous avons observé un important transfert de lipides du véhicule lipidique vers les cellules cancéreuses dans le véhicule oxydé et non oxydé. Les lipides semblaient s'accumuler principalement dans les endosomes et seulement en petite partie sur la membrane cellulaire. En termes de propriétés biophysiques, nous avons observé la formation de radeaux lipidiques, la séparation de phase et la mort cellulaire, mais qui n'étaient pas significativement plus élevés qu'avec des lipides non oxydés. La mort cellulaire due aux lipides oxydés était morphologiquement différente de celle des témoins. En conclusion, les lipides oxydés n'ont pas eu un effet plus important sur les cellules cancéreuses que les lipides non oxydés. Cela pourrait être dû à une oxydation inefficace des lipides dans le système d'administration. Dans l'ensemble, nous avons réussi à mettre au point un essai pour sonder le transfert
de membrane et un protocole pour former des GPMV dans les cellules cancéreuses afin d'étudier les propriétés biophysiques des membranes. |
| Accès : | Identifiez-vous avant d'accéder au document électronique |
| Disponible en ligne : | Oui |
| Lieu du stage : | UCLouvain Drug Research Institute – Unité Pharmacologie cellulaire et moléculaire |
| Département du TFE : | Biologie médicale |
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