| Titre : | Validation de la méthode automatisée pour les titrages des anticorps anti-A et anti-B |
| Auteurs : | Yasmine Benmansour, Auteur ; Nina Dr.Olteanu, Promoteur |
| Type de document : | Travail de fin d'études |
| Editeur : | Woluwe-Saint-Lambert : Haute École Léonard de Vinci, 2022 |
| Langues: | Français |
| Index. décimale : | TFE - Biologie médicale |
| Descripteurs : |
HE Vinci Anticorps ; Cellules souchesAutres descripteurs titrimetrie |
| Résumé : |
Les anticorps anti-A et anti-B sont des anticorps naturels qu’un individu peut développer après quelques mois de vie lorsqu’il ne possède pas les antigènes A et/ou B. Les anticorps anti-A et anti-B confèrent une immunité à notre organisme. Ces anticorps peuvent être mesurés et cette mesure, appelée titre, permet d'évaluer l'immunité d'un individu. Ces anticorps anti-A et anti-B sont titrés pour différentes raisons : pour déterminer l'immunité d'une personne et pour le suivi avant et après une greffe de cellules souches hématopoïétiques afin de déterminer le succès de la greffe chez le receveur. Jusqu'à présent, le laboratoire (LHUB-ULB) effectue le titrage des anticorps par distribution manuelle en tube, qui est la méthode de référence. Actuellement, le laboratoire souhaite développer une méthode automatisée pour répondre à l'augmentation des demandes d'analyses d'iso-hémagglutinines après l'implantation du Nouvel Institut Bordet sur le site d'Erasme, hôpital de référence pour le traitement des cancers et leur suivi. L'automatisation de ces analyses permettrait d'obtenir des résultats dans un délai plus court et d'analyser un plus grand nombre d'échantillons en même temps. Dans un premier temps, il a été déterminé, sur base de plusieurs analyses, lequel des protocoles proposés par la firme serait utilisé par rapport à la méthode manuelle de référence afin de pouvoir valider la méthode automatisée sur base d'analyses statistiques effectuées sur les résultats. Tout d'abord, deux types de cassettes ont été utilisés sur une méthode automatisée : les cassettes Reverse et les cassettes Neutral. Une comparaison a été faite entre les cassettes Reverse, avec des temps d'incubation de 30 et 45 minutes, et les cassettes Neutral avec 30 et 60 minutes d'incubation.
Les résultats des cassettes Neutral avec 30 minutes d'incubation ont été comparés aux résultats des cassettes Neutral avec 60 minutes d'incubation. Les résultats des cassettes Reverse avec 30 minutes d'incubation ont été comparés aux résultats des cassettes Reverse avec 45 minutes d'incubation. Le but de cette comparaison est de mettre en évidence une éventuelle concordance des résultats entre les deux protocoles avec des temps d'incubation différents. Les résultats se sont avérés être les mêmes pour les cassettes Reverse avec les deux protocoles et pour les cassettes Neutral avec les deux protocoles. Il a donc été décidé de choisir le protocole nécessitant le temps d'incubation le plus court possible pour poursuivre la validation, afin de gagner du temps. Les analyses ont ensuite été réalisées dans un second temps sur les cassettes Neutral avec 30 minutes d'incubation et Reverse avec 30 minutes d'incubation en comparaison avec la méthode de référence en tube pour tous les échantillons testés. Les résultats obtenus ont permis de conclure que pour le titrage des anticorps anti-A avec la méthode automatisée sur cassettes et la méthode de référence manuelle en tube, n’ont pas montré de différence significative avec un coefficient de corrélation (R2) proche ou égal à 1pour un même échantillon. Par contre, pour le titrage des anticorps anti-B, un manque de concordance a été observé pour les résultats obtenus avec un coefficient de corrélation (R2) plus proche de 0 que de 1 pour la comparaison des deux méthodes. Cependant, le coefficient de corrélation était quasi similaire pour les deux types de cassettes. En conclusion, la validation de la méthode automatisée n'a pu être achevée par faute de quantité suffisante d'analyses afin d’affirmer une éventuelle validation. Mais les résultats préliminaires semblent être en faveur d'une validation de la méthode. Le laboratoire devra encore tester des échantillons pour le titrage des anticorps anti-B pour les patients du groupe A et du groupe O afin de déterminer si les différences entre les deux méthodes sont juste ponctuelles ou non, et pouvoir décider de valider ou non la méthode. Le laboratoire devra également tester la fidélité intermédiaire, la répétabilité et la reproductibilité |
| Accès : | Identifiez-vous avant d'accéder au document électronique |
| Disponible en ligne : | Oui |
| Lieu du stage : | Hôpital Erasme (LHUB- ULB) |
| Département du TFE : | Biologie médicale |
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